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GlosarioEspectrometría de masas: qué confirma de un péptido
La espectrometría de masas es la técnica que mide la masa de las moléculas ionizadas y, en un péptido, permite comprobar que la masa medida coincide con la teórica.
Qué es la espectrometría de masas
Un espectrómetro de masas ioniza las moléculas de la muestra, las separa según su relación masa-carga y mide cuántas llegan de cada tipo. En proteómica es una herramienta indispensable para identificar y cuantificar proteínas en muestras complejas. 1 Aplicada a un péptido sintético, la pregunta es más sencilla: ¿la masa medida es la que predice su fórmula?
Los péptidos grandes se ionizan con varias cargas a la vez, de modo que el mismo péptido aparece como una serie de señales; a partir de ellas se calcula la masa neutra. Es lo que ocurre con retatrutide, de unos 4 731 Da, o con tesamorelin, de unos 5 135,9 Da. En un péptido corto, como epitalon (390,3 Da), la señal es una sola y la lectura es directa.
Qué diferencias distingue la masa
- Una glicina de más o de menos. Un análisis de material decomisado en Dinamarca encontró análogos de ipamorelin y de un GRF(1-29) modificado con una glicina adicional en el extremo amino, identificados por espectrometría de masas de alta resolución. 2 Esa glicina suma unos 57 Da.
- Un grupo acetilo. El fragmento de la timosina β4 que se vende como TB-500 se caracterizó como el 17-23 acetilado (Ac-LKKTETQ) por HPLC acoplada a espectrometría de masas de alta resolución. 3
- Una oxidación. Una metionina oxidada pesa 16 Da más; una asparagina desamidada, algo menos de 1 Da más. Son dos de las degradaciones que la masa detecta, y que explican por qué tesamorelin, con una metionina y dos asparaginas, se conserva fría y protegida. 45
Lo que la masa no distingue son los isómeros: dos péptidos con la misma composición y un residuo en forma L o D tienen la misma masa. Ahí es donde la HPLC completa el análisis.
La espectrometría de masas en las fichas
Cada ficha da la masa teórica del péptido: es el dato con el que se compara la medida. En un certificado de análisis completo aparecen el cromatograma y la masa medida frente a la teórica.
Preguntas frecuentes
¿Qué quiere decir que la masa coincida con la teórica?
Que la masa medida en el espectrómetro es, dentro del error del instrumento, la que calcula la fórmula del péptido: es la prueba de que la molécula tiene los residuos y las modificaciones esperadas.
¿Basta la masa para saber que un péptido es puro?
No. La masa confirma qué molécula hay, pero no cuánta hay de otras: la pureza se mide con HPLC. Por eso se usan juntas.
¿Qué es un dalton?
Es la unidad de masa atómica: 1 Da equivale a la masa de un átomo de hidrógeno, aproximadamente. Los péptidos del catálogo van de 307,3 Da (glutatión) a unos 5 135,9 Da (tesamorelin), y la somatropina, una proteína, pesa unos 22 125 Da.
Referencias científicas
- Aebersold R, Mann M. Mass spectrometry-based proteomics. Nature. 2003;422(6928):198-207. PubMed 12634793DOI
- Gajda PM, Holm NB, Hoej LJ, et al. Glycine-modified growth hormone secretagogues identified in seized doping material. Drug Test Anal. 2019;11(2):350-354. PubMed 30136411DOI
- Esposito S, Deventer K, Goeman J, et al. Synthesis and characterization of the N-terminal acetylated 17-23 fragment of thymosin beta 4 identified in TB-500, a product suspected to possess doping potential. Drug Test Anal. 2012;4(9):733-8. PubMed 22962027DOI
- Li S, Schöneich C, Borchardt RT. Chemical instability of protein pharmaceuticals: Mechanisms of oxidation and strategies for stabilization. Biotechnol Bioeng. 1995;48(5):490-500. PubMed 18623513DOI
- Geiger T, Clarke S. Deamidation, isomerization, and racemization at asparaginyl and aspartyl residues in peptides. Succinimide-linked reactions that contribute to protein degradation. J Biol Chem. 1987;262(2):785-94. PubMed 3805008
Péptidos del catálogo relacionados
- RetatrutideAgonista triple de los receptores de GIP, GLP-1 y glucagón, con ensayos de fase 3 publicados. $1,400 MXN10 mg
- TirzepatidaAgonista dual de GIP y GLP-1, principio activo de medicamentos con registro, con ensayos de fase 3 en obesidad y diabetes tipo 2. $1,250 MXN20 mg
- GHK-CuComplejo de cobre(II) del tripéptido GHK, descrito en estudios de reparación de tejidos y de piel que salen casi todos del mismo grupo. $449 MXN50 mg
- BPC-157Pentadecapéptido sintético estudiado sobre todo en roedores, con tres estudios piloto en personas. $650 MXN5 mg
- TB-500Fragmento acetilado de la timosina β4 que contiene su región de unión a actina, estudiado en reparación de heridas. $800 MXN5 mg
- IpamorelinPentapéptido que activa el receptor de grelina y libera hormona de crecimiento sin elevar ACTH ni cortisol en su estudio original. $1,200 MXN10 mg
- TesamorelinAnálogo de GHRH de 44 residuos, principio activo también de un medicamento que la FDA aprobó en 2010. $2,000 MXN10 mg
- EpitalonTetrapéptido Ala-Glu-Asp-Gly descrito en estudios de telomerasa y de envejecimiento. $720 MXN10 mg
- SelankHeptapéptido análogo de la tuftsina, estudiado en modelos de ansiedad y en dos estudios clínicos pequeños. $1,100 MXN10 mg
- SemaxHeptapéptido Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, análogo de ACTH(4-10) sin actividad suprarrenal, estudiado en ratas en BDNF e isquemia. $500 MXN5 mg
- 5-Amino-1MQMolécula pequeña que inhibe la enzima NNMT y elevó el NAD+ en células; estudiada en ratones y adipocitos. $1,250 MXN50 mg
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